SEMINARSKI RAD IZ POLJOPRIVREDE
|
|||||
BOLESTI DUHANAPLAMENJAČA (PERONOSPORA TABACINA)Plamenjača duhana je bolest koju uzrokuje pseudogljiva Peronospora tabacina. Bolest se može pojaviti u svim fazama razvoja biljke, a pseudogljiva napada isključivo nadzemne dijelove duhana. Simptomi ove bolesti relativno su lako uočljivi i prepoznatljivi, tako da je dijagnozu u većini slučajeva moguće dati samo na osnovu simptoma. Na licu lista duhana zaraženog plamenjačom pojavljuju se klorotične okruglaste pjege (Slika 1).
Ukoliko se list okrene, na naličju pjega moguće je uočiti plavičastu do sivkastu baršunastu prevlaku, koja je gušća što je viša vlažnost zraka tijekom razdoblja u kojem se pregled obavlja. Prevlaka je masa sporangiofora i sporangija pseudogljive koja izbija iz lista. Ukoliko se takva prevlaka promatra pod stereomikroskopom na njenim rubovima moguće je uočiti pojedinačne sporangiofore sa sporangijima. Sporangiofori i sporangiji izgledaju poput stabalaca na čijim vrhovima se stvaraju kapljice. Pod mikroskopom moguće je uočiti sporangije i sporangiofore koji se granaju dihotomno, u obliku slova V (Slika 2). Takvo grananje sporangiofora svojstveno je pseudogljivama iz roda Peronospora. Sporangiji Peronospora tabacina ovalni su, dimenzija 12 -18 um x 15 - 25 um. Ova pseudogljiva ne može se uzgajati na umjetnim hranjivim podlogama.
CRNA TRULEŽ KORIJENA (THIELAVIOPSISBASICOLA - CHALARA ELEGANS)Crna trulež korijena duhana je bolest koju uzrokuje
gljiva Thielaviopsis basicola. Drugo ime ove gljive je Chalara
elegans, koje označava njen drugi konidijski stadij. Kao što je slučaj
sa svim bolestima korijena, simptomi ove bolesti nisu dovoljno specifični
da bi omogućili točnu dijagnozu samo na osnovi vizualnog pregleda zaraženih
biljaka. Listovi napadnutih biljaka žute, biljke slabije rastu, venu i
suše se. Na korijenu slabije napadnutih biljaka uočavaju se nepravilno
raspoređene tamne zone, dok je korijen jače napadnutih biljaka u cijelosti
taman, smeđe do gotovo crne nijanse. T. basicola u korijena duhana stvara
obilje hlamidospora, tj. makrokonidija koje imaju ulogu održavanja gljive.
Makrokonidije u tkivu biljke moguće je relativno lako uočiti pod mikroskopom
(Slika 3). Makrokonidije su tamnosmeđe, višestruko septirane, debele stanične
stjenke, a u zrelosti se raspadaju na fragmente (Slika 4). T. basicola
stvara i drugi tip konidija, mikrokonidije. Mikrokonidije ove gljive duge
su 4 - 6 um, bezbojne, gotovo pravilnog cilindričnog oblika, a nastaju
unutar konidiogene stanice (Slika 4). Za potrebe dijagnoze oboljeli korijen
potrebno je isprati, osušiti, a zatim sa nekoliko mjesta na njemu učiniti
tanak prerez i staviti ga pod mikroskopsko stakalce. Prerez je preporučljivo
napraviti na uočljivo tamnim, simptomatičnim dijelovima korijena. Ukoliko
je u biljci prisutna T. basicola, često će na takvim preparatima biti
moguće uočiti hlamidospore.
BAKTERIJSKA PLAMENJAČA (PSEUDOMONAS SYRINGAE PV. TABACI)Bakterijska plamenjača duhana je bolest
koju uzrokuje bakterija Pseudomonas syringae pv. tabaci. Zaraza
ovom bakterijom dovodi do nastanka pjega na listovima duhana. Pjege su
obično okružene svijetlim klorotičnim prstenom, pa se na osnovi ovog simptoma
može pretpostaviti o kojoj se bolesti radi (Slika 6). Za točnu dijagnozu
bakteriju je potrebno izolirati i determinirati.
MOZAIČNA BOLEST (VIRUS MOZAIKA DUHANA)Mozaik duhana je bolest koju uzrokuje virus
mozaika duhana - TMV (tobacco mosaic virus). Kako se
radi o virusnoj bolesti, točnu dijagnozu nije moguće odrediti na osnovi
simptoma, već samo korištenjem adekvatnih seroloških ili molekularnih
tehnika u laboratoriju. Tehnike koje je moguće koristiti u dokazivanju
biljnih virusa su imunodifuzija, ELISA, hibridizacija nukleinskih kiselina
i lančana reakcija polimeraze. Najpraktičnija i najčešće korištena metoda
dokazivanja biljnih virusa je tzv. DAS - ELISA (Double Antibody Sandwich
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Spomenuta metoda temelji se na reakciji
antigena (virusa) i protutijela koja postaje vidljiva zbog obojenja supstrata
u kojem su antigen i protutijelo reagirali. Protutijela i kemikalije potrebne
za izvođenje ove metode naručuju se od specijaliziranih proizvođača. Na
tržištu je danas moguće pronaći protutijela za većinu gospodarski značajnih
biljnih virusa. U kompletima za izvođenje ELISA testa nalaze se i detaljne
upute za izvođenje ove tehnike. Lančana reakcija polimeraze (PCR) manje
se koristi u rutinskoj dijagnostici biljnih virusa, prvenstveno iz razloga
što je za izvođenje ove tehnike potrebna vrlo skupa oprema. PCR se temelji
na umnožavanju specifičnog fragmenta nukleinske kiseline virusa uz pomoć
komplementarnih ologonukleotidnih početnica. Produkti reakcije očitavaju
se na gelu nakon elektroforeze. Početnice se naručuju od specijaliziranih
proizvođača. Na tržištu je danas moguće pronaći veći broj adekvatnih početnica
za brojne gospodarski značajne biljne viruse.
Postoji osobitost virusa mozaika duhana koja ponekad omogućuje davanje relativno točne dijagnoze na osnovi mikroskopskog pregleda zaraženih biljaka. Virus mozaika duhana u biljnom tkivu relativno brzo kristalizira, pri čemu čestice virusa stvaraju prave kristale. Kristali virusa mozaika duhana oblika su pravilne šesterokutne prizme sa bridovima dugim 15 - 20 u m i najčešće se mogu uočiti u dlačicama listova zaraženih biljaka. Ove strukture dobro su vidljive svjetlosnim mikroskopom, no nije ih uvijek lako pronaći. |